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飼料中粗蛋白的測定過程解析
來源: 本站 類別:技術文章 更新時間:2014-02-07 閱讀次
1.粗蛋白的測定原理:
凱氏法測定試樣中的含N量,即在催化劑作用下,用H2SO4破壞有機物,使含N物轉化成(NH4)2SO4,加入強堿進行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出N含量,將結果乘以換算系數(shù)6.25,計算出CP含量。
2.粗蛋白的測定材料與器具:
粗蛋白的測定需要使用到的儀器有:H2SO4、混合催化劑、NaOH、硼酸、混合指示劑、HCl標準液、蔗糖、硫酸銨、硼酸吸收液
3.粗蛋白的測定方法步驟
1、試樣的消煮,稱取試樣0.5g,準確至0.0202g,放入消煮管中加入6.4g混合催化劑與試樣混合均勻,再加入12ml H2SO4將消煮瓶置于電爐上加熱,開始小火,待樣品焦化、泡沫消失后,再加強火力(360-410℃)直至透明的藍綠色,然后再繼續(xù)加熱至少2h。
2、NH3的蒸餾
將試樣消煮液冷卻,加入20ml蒸餾水,轉入100ml容量瓶中,冷卻后用水稀釋至刻度,搖勻,作為試樣分解液。將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入裝有20ml硼酸吸收液和2滴混合指示劑的錐形瓶內。蒸汽發(fā)生器的水中應加入甲基紅指示劑數(shù)滴,硫酸數(shù)滴,在蒸餾過程中保持此液為橙紅色,否則需補加硫酸。準確移取試樣分解液10-20ml注入蒸餾裝置的反應室中,用少量蒸餾水沖洗進樣入口,塞好入口玻璃塞,再加入10ml氫氧化鈉溶液,小心提起玻璃塞使之流入反應室,將玻璃塞塞好,且在入口處加水密封,防止漏氣。蒸餾4min降下錐形瓶使冷凝管末端離開吸收液面,再蒸餾1min,用蒸餾水沖洗冷凝管末端,洗液均需流入錐形瓶內,然后停止蒸餾。
3、滴定
蒸餾后的吸收液用HCl標準溶液滴定,溶液由藍綠色變?yōu)榛壹t色為終點。
4、空白測定
稱取蔗糖0.5g代替試樣進行空白測定
5、計算
CP=
V2:滴定試樣時所需標準溶液體積ml
V1:滴定空白時,所需標準溶液體積ml
C:鹽酸標準溶液濃度mol/l
M:試樣質量 g
0.0140:與1mol HCl標準溶液相當?shù)囊詆表示的N的質量。
6.25:N換算成CP的平均系數(shù)。
6、重復性
每個試樣的平行樣進行測定,以其算術平均什為結果。
當粗蛋白質在25%以上時,允許相對偏差為1%;
當粗蛋白質在10%~25%之間時,允許相對偏差為2%;
當粗蛋白質在10%以下時,允許相對偏差為3%。
飼料是家畜成長的營養(yǎng)來源,飼料中蛋白質含量的高低,直接決定了家畜的質量高低。因此,飼料中蛋白質的含量測定是一個很重要的步驟。而蛋白質存在于一切動植物體中,是一切生命活動的物質基礎。家畜從飼料中攝取蛋白質及其分解產物,以組成自身的蛋白質,因此,飼料中蛋白質含量的分析就成為評價飼料營養(yǎng)價值的主要指標。
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