您現(xiàn)在的位置:中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng) > 技術(shù)文章 > 牛奶蛋白質(zhì)測(cè)定的優(yōu)化操作
牛奶蛋白質(zhì)測(cè)定的優(yōu)化操作
牛奶蛋白質(zhì)是牛奶檢測(cè)的重要指標(biāo),作為生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一,蛋白質(zhì)在催化生命體內(nèi)各種反應(yīng)進(jìn)行、調(diào)節(jié)代謝、抵御外來物質(zhì)入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關(guān)重要的作用。目前,牛奶蛋白質(zhì)的測(cè)定方法主要為國(guó)標(biāo)凱氏定氮法,是有機(jī)化合物含氮量測(cè)定最常有的方法,是蛋白質(zhì)測(cè)定的經(jīng)典方法,即使用蛋白質(zhì)測(cè)定儀來進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)測(cè)定儀適用樣品廣泛,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,但試劑消耗量大,檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),消化約6~8 h,且消化后樣品需定容,定容時(shí)容量瓶未搖勻,很容易出現(xiàn)結(jié)晶現(xiàn)象,費(fèi)時(shí)費(fèi)力。
為改善國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法樣品稱樣量大,消化時(shí)間長(zhǎng),消化后的樣品需定容,操作步驟多的現(xiàn)狀,本文對(duì)樣品的稱樣量進(jìn)行了優(yōu)化,經(jīng)典凱氏定氮法液體樣品的稱樣量為1~25 mL,因牛奶樣品均勻度較好,故本方法將樣品的稱樣量?jī)?yōu)化為1.0~1.5g。將樣品的稱樣量從10g減小到1.5g,其他檢測(cè)條件不變。如果取樣具有代表性,改變樣品的稱樣量,對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響不大。
樣品消化時(shí)間主要包括氧化時(shí)間,沸騰時(shí)間。氧化時(shí)間中濃硫酸將有機(jī)樣品中的碳轉(zhuǎn)化成CO2(這時(shí)的溶液為黑色),氫元素轉(zhuǎn)化為H2O,氮元素轉(zhuǎn)化為銨鹽。氧化完畢后,溶液變澄清,進(jìn)入沸騰時(shí)間,在沸騰30 min后,樣品中氮元素全部轉(zhuǎn)化為氨,氮的回收率達(dá)到最高。樣品消化結(jié)束后,消化管中應(yīng)剩余5-6 mL濃硫酸,如果消化時(shí)硫酸消耗完了,會(huì)造成氮的損失。在消化期間如果硫酸加入量少,樣品會(huì)出現(xiàn)結(jié)晶情況,因此,硫酸用量應(yīng)適當(dāng),而硫酸用量取決于樣品量,本方法中硫酸量的優(yōu)化參照的為國(guó)標(biāo)方法,國(guó)標(biāo)方法10 g樣品濃硫酸的用量為20 mL,即1 g樣品硫酸消耗的量為2 mL,現(xiàn)將樣品的稱樣量減小為1~1.5 g,硫酸的消耗量應(yīng)不大于3 mL,為保證樣品消化完后濃硫酸的量有剩余,故將硫酸的量定優(yōu)化為8.5 mL。
- 【中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng)】聲明部分文章轉(zhuǎn)載自其它媒體,轉(zhuǎn)載目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),且不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)和其它問題,請(qǐng)?jiān)?0日內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系。